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3-11
動物模型名稱:脂多糖(LPS)致膿毒血癥急性肺損傷大鼠模型動物的種屬、品系:SD大鼠動物性別:雄性動物年齡:成年動物體重:160~200g模型制備信息制備環(huán)境:屏障環(huán)境制備方法:脂多糖(LPS)誘導(dǎo)。用碘伏消毒大鼠腹部皮膚,用棉花擦除碘伏,按10mg/kg體重一次腹腔注射LPS藥液。制備周期:1周判定指標(biāo):①炎癥因子含量增加;②肺組織含水量增加;③肺臟組織病理學(xué)改變:膿毒癥6小時:肺泡壁毛細(xì)血管擴(kuò)張、充血,肺泡擴(kuò)張不均勻,部分肺泡萎陷,肺泡壁明顯增厚,間質(zhì)見多形核細(xì)胞浸潤。膿...
3-4
動物雄性成年C57BL/6小鼠(8-16周齡;體重約20g);造模在50ml塑料管上開幾個孔以保持氣流,將動物置于這樣的塑料管中,從而使動物暴露于慢性束縛應(yīng)激中。實驗從上午11:00開始,每天4-8小時,整個過程持續(xù)14天,而對照組則在同一時間無束縛地剝奪食物和水。在慢性束縛的最后一天測量每只小鼠的體重。模型評估1.蔗糖偏好試驗小鼠單獨飼養(yǎng),無任何應(yīng)激條件下,給予1%蔗糖溶液和水2天;1%蔗糖溶液和水的瓶子位置在24小時切換。之后,小鼠被剝奪食物和水12小時;在黑暗環(huán)境下,同...
3-4
戊四氮(Pentylenetetrazole,PTZ)是一種高度敏感的化合物,有毒物質(zhì);小心處理。1.將2mg/mLPTZ溶解在無菌0.9%(w/v)NaCl中。在使用當(dāng)天準(zhǔn)備PTZ。2.對于野生型C57BL/6小鼠,試驗建議劑量為30-35mg/kg。對PTZ的敏感性取決于使用的小鼠品系,注射劑量因?qū)嶒災(zāi)康亩悺?.服用PTZ后觀察動物行為30分鐘,并對異常行為進(jìn)行分類和評分。如果可能,觀察動物24小時,或注射后至少再觀察6-10小時,特別是在癲癇發(fā)作嚴(yán)重時得分達(dá)到3分或以...
2-25
背景:顱腦外傷(TBI)是世界范圍內(nèi)威脅生命的疾病。大多數(shù)中國人由于運動受傷,辦公室或家中意外摔倒以及摩托車受傷而患有TBI。由于社會對疾病的了解不多,因此TBI被稱為“沉默流行病”。TBI后繼發(fā)性腦損傷引起病理,生理和生物學(xué)反應(yīng),導(dǎo)致腦功能障礙。生物和化學(xué)過程通常觸發(fā)連鎖反應(yīng),可導(dǎo)致炎癥細(xì)胞,能量缺乏,興奮性毒性,細(xì)胞凋亡和氧化應(yīng)激。氧化應(yīng)激在上述過程中起重要作用。氧化會增強炎癥和其他反應(yīng),因此促進(jìn)炎癥和其他反應(yīng)會加劇氧化應(yīng)激并形成惡性循環(huán)。氧化應(yīng)激在TBI后一小時發(fā)生,并...
2-25
目的:理解低氧預(yù)處置對子宮內(nèi)膜異位癥大鼠模型異位病灶構(gòu)成的影響,藉此進(jìn)一步說明EMs發(fā)作開展的分子機制,從而為其防治供新思緒。辦法:Lewis雌性大鼠隨機分為兩組,分別給予HPC(8%O2)和常壓常氧(21%O2)處置8h,隨即取其子宮組織移植至正常大鼠腹壁。術(shù)后14d記載移植灶體積,并采用ELISA、免疫組化、Westernblot、RT-PCR和Tunnel法,對血清和腹腔液以及移植前子宮組織和移植病灶停止檢測。結(jié)果:HPC可顯著上調(diào)大鼠子宮血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)m...
2-18
一、原理培養(yǎng)的細(xì)胞在一般條件下要求有一定的密度才能生長良好,所以要進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。計數(shù)結(jié)果以每毫升細(xì)胞數(shù)表示。細(xì)胞計數(shù)的原理和方法與血細(xì)胞計數(shù)相同。在細(xì)胞群體中總有一些因各種原因而死亡的細(xì)胞,總細(xì)胞中活細(xì)胞所占的百分比叫做細(xì)胞活力,由組織中分離細(xì)胞一般也要檢查活力,以了解分離的過程對細(xì)胞是否有損傷作用。復(fù)蘇后的細(xì)胞也要檢查活力,了解凍存和復(fù)蘇的效果。用臺盼蘭染細(xì)胞,死細(xì)胞著色,活細(xì)胞不著色,從而可以區(qū)分死細(xì)胞與活細(xì)胞。利用細(xì)胞內(nèi)某些酶與特定的試劑發(fā)生顯色反應(yīng),也可測定細(xì)胞相對數(shù)...
2-18
材料:6孔板marker筆直尺20微升槍頭(滅菌)無血清培養(yǎng)基PBS準(zhǔn)備:所有能滅菌的器械都要滅菌,直尺和marker筆在操作前紫外照射30min(超凈臺內(nèi))流程:1、先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著,均勻地劃橫線,大約每隔0.5~1cm一道,橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。2、在空中加入約5X105個細(xì)胞,具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同,掌握為過夜能鋪滿。3、第二天用槍頭比著直尺,盡量垂直于背后的橫線劃痕,槍頭要垂直,不要傾斜。4、用PBS洗細(xì)胞3次,去除劃下的細(xì)胞,加入...
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